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剧中律政界人物须面对多宗棘手案件，例如：医生非法替女朋友堕胎而导致误杀，一名离婚母亲毒杀亲生儿子，轻度弱智女子被诱奸，警察误认为劫匪而错手杀人，少年争执最终导致谋杀，还有丁柔（陈秀雯）在处理一宗教唆谋杀案时，竟被诬告杀人！《壹号皇庭》第四辑描述了各主角正面对严峻的法律挑战，而他们须秉承一贯律政精神，去审理错综复杂的案件。 另外，各人的感情关系亦变化多端，丁柔与余在春（欧阳震华）终结为夫妇，但此际春却邂逅法医官殷芷杰（邓萃雯），柔、春之间面临感情决裂。而当江承宇（陶大宇）与汤芷琪（梁婉静）的感情稳定下来时，琪再重遇前度情夫罗伟林（李龙基），而宇又与新相识的程若晖（宣萱）产生了一段微妙……